登革热病毒NS1抗原检测试剂胶体金法

登革热NS1抗原检测试剂盒

此试剂盒用于登革热病毒的早期检测，通过酶免分析法检测人血清中的NS1抗原。它可以在IgG和IgM抗体出现之前对人血清中的登革热病毒的进行早期诊断。此试剂盒不能用于筛查血液或血液成分，仅用于研究。

简介
登革热是一种急性病毒性疾病，它主要通过埃及伊蚊传播。登革热在临床上主要表现为：双相热、皮疹和造血抑制，还可表现出全身症状，如浑身不舒服、关节痛、肌肉疼痛和头痛，有时还可能出现较为**的出血性高烧，并可能导致致命性的休克。登革热主要流行于热带和亚热带地区，大概每年会发生100,000,000例。据统计，每年大概会出现500到1000万例登革热病人，同时还会出现250000到500000例登革热出血热。在2002年，据报道，30多个拉丁美洲的国家出现10000000例登革热病人，并且大多数是登革热出血热（DHF）病人。之后在2003年到2005年，在印度的一些地方也广泛流行DHF。在美国，据报道，DHF病人在1996到2002年就增加了三倍。据报道说，登革热也在夏威夷和德克萨斯州的拉雷多爆发过。由于病毒的潜在传染性，一些病毒包括登革热都被列为CDD的A类潜在传染原。登革热NS1（非结构蛋白）蛋白是一个六聚体分泌的蛋白。它是病毒RNA复制中重要的角色，它强烈的*原性引起抗体和补体的活性。在急性感染血液中可检测到NS1抗原。此试剂盒可检测即时感染患者血清中的NS1抗原。

实验原理
此试剂盒具有高灵敏度，快速和可靠性分析，采用夹心法检测血清中低含量的NS1。
质控和未知血清样品用样品稀释缓冲液稀释。微孔中包被高效的NS1抗体，封闭，样品中的NS1抗原被捕获，与二抗形成夹心。通过辣根过氧化物酶和TMB底物显色液产生的颜色反应来判断NS1抗原，用酸溶液终止反应，然后用酶标仪在450nm处读取吸收值。阴性和阳性血清测得的值作为样品中NS1抗原的诊断依据。

试剂盒组成
1. 微孔板：96孔，2-8℃下保存至有效期
2. 阴性质控：1x300µL，有助于试剂盒有效性的验证，2-8℃下保存至有效期，含有沉淀物的话使用前应离心
3. 阳性质控：1x300µL，有助于试剂盒有效性的验证，2-8℃下保存至有效期，含有沉淀物的话使用前应离心
4. 临界质控：1x300µL，检测临界值，2-8℃下保存至有效期，含有沉淀物的话使用前应离心
5. 样品稀释液：1x15ml，含有二抗，Proclin（0.02-0.03%）作为防腐剂，2-8℃下保存至有效期
6. 酶联物：1x150µL,100X，含有辣根过氧化物酶标记的多克隆抗体，使用前混匀，2-8℃下保存至有效期
7. 酶联物稀释液：1x12ml,用于100X酶连液的稀释，直接将酶联物加入此溶液即得到100X的酶连液，，配制液在2-8℃下可保存2周。未开封的稀释液2 -8℃下保存至有效期。
8. 洗涤缓冲液：120ml，10X，2-8℃下保存至有效期
9. TMB底物液：1x12ml，2-8℃下保存至有效期
10. 终止液：1x6ml，室温下保存至有效期
实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪
2. 去离子水或双蒸水
3. 真空泵
4. 37℃孵箱
5. 1-10µL的单通道移液器，50-200µL单通道和多通道的移液器
6. 聚丙烯试管或96孔稀释板
7. 保鲜膜
8. 计时器
9. 混合器